聚乙烯亚胺，线性PEI，Polyethylenimine, Linear, MW 25000, Transfection Grade

转染试剂的制备和储存建议

    这些准则是我们根据研究，测试和客户反馈提出的建议。有其他方法可供选择，但我们建议遵循以下建议，以易于采用和始终如一的高性能。这些方法改编自《冷泉港协议》，这是瞬时转染文献的绝佳辅助资源。

试剂制备（1 mg / mL）

材料：

    1.1克PEI 25K（kingmorn目录编号KE1075）。

    2.1升Milli-Q®水，注射用水（WFI）或相当的生物级水

    3.12 M盐酸（HCl）

    4.10 M氢氧化钠（NaOH）

    5.一次性0.1-0.2um PES真空无菌过滤器。

    6.用于试剂等分试样的无菌HDPE或聚丙烯储存瓶。

设备：

    1.1L玻璃烧杯

    2.1L玻璃量筒

    3.校准pH计

    4.2 x一次性1mL塑料移液器

    5.搅拌盘

    6.PTFE涂层搅拌棒

    7.真空泵

方法：

    1.将1g PEI 25K倒入烧杯中，并悬浮在900 mL水中。

    2.添加搅拌棒并设置搅拌以产生小涡旋。

    3.滴加盐酸直至pH <2.0。

    4.盖上烧杯的顶部，搅拌3小时，直到粉末完全溶解。

    5.滴加氢氧化钠直至pH为6.9-7.1。

    6.将溶液转移到量筒中，加水直至总体积为1L。

    7.通过真空膜的无菌过滤器。

    8.根据需要分装并储存在-20℃。

 试剂储存：

    冷冻的等分试样可以在-20℃下保存长达一年。可以将等分试样解冻，并在4℃下保存长达两周，但切勿重新冷冻。

文献参考

    1. Polyethylenimine (PEI), linear (1 mg/mL). Cold Spring Harbor Protocols 2008, pdb.rec11323– pdb.rec11323 (2008). doi:10.1101/pdb.rec11323