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一、DNA甲基化检测技术服务—BSP法

DNA甲基化是表观遗传修饰的主要方式,能在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表现。一般说来,DNA的甲基化会抑制基因的表达。DNA的甲基化对维持染色体的结构、X染色体的失活、基因印记和肿瘤的发生发展都起着非常重要的作用。

— BSP法原理:用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变。随后设计BSP引物进行PCR,在扩增过程中尿嘧啶全部转化为胸腺嘧啶,最后对PCR产物进行测序就可以判断CpG位点是否发生甲基化称为BSP-直接测序方法。如将PCR产物克隆至载体后进行测序,可以提高测序成功率,这种方法称为BSP-克隆测序法。

— 服务内容

1. 基因组DNA的Bisulfite转化。

2. DNA甲基化检测——基于BSP(Bisulfite sequencing PCR)法。

3.本公司所用试剂全为进口试剂,实验全程质量保证。

— 样品要求

细胞(≥106 个)、组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、血清(≥1.5ml)等样品材料,基因组DNA(体积≥50μl,浓度≥50 ng/μl)。

目的基因信息或genebank序列号。

— 终产品

BSP-直接测序方法:Bisulfite处理的基因组DNA;测序峰图及实验报告。

BSP-克隆测序方法:Bisulfite处理的基因组DNA;阳性克隆质粒;测序峰图及实验报告。

— 服务周期

BSP-直接测序方法:1~2周

BSP-克隆测序方法:2~4周

— 关于引物

在基于Bisulfite 转化的DNA甲基化检测的方法中,引物是实验成功的关键因素,且因检测的目的基因片段的不同,合适引物的存在与否有较大的不确定性,请尽量采用经过验证的引物,如需DNA甲基化检测引物设计服务,价格另议。


二、DNA甲基化检测技术服务—MSP法


— MSP法原理:用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶(C)被转化为5-甲基胞嘧啶(mC)(即 尿嘧啶(U))而甲基化的胞嘧啶则不变。设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR,通过电泳图检测甲基化状态。 

— 服务内容

1. 基因组DNA的Bisulfite转化。

2. DNA甲基化检测——基于MSP(Methylation Specific PCR)法。

3.本公司所用试剂全为进口试剂,实验全程质量保证。

— 样品要求

细胞(≥106 个)、组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、血清(≥1.5ml)等样品材料,基因组DNA(体积≥50μl,浓度≥50 ng/μl)。

目的基因信息或genebank序列号。


— 终产品

Bisulfite处理的基因组DNA;

实验报告(包括MSP产物的电泳图片)。

— 服务周期

1~2周

— 关于引物 

在基于Bisulfite 转化的DNA甲基化检测的方法中,引物是实验成功的关键因素,且因检测的目的基因片段的不同,合适引物的存在与否有较大的不确定性,请尽量采用经过验证的引物,如需DNA甲基化检测引物设计服务,价格另议。


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