KC1025 kingmorn 30% Acryl/Bis Solution(29:1)丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺
货号：KC1025
规格：100ml；500ml
产品简介：
30% Acryl/Bis Solution(29:1)丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺即30%的丙烯酰胺,N,N′-亚甲双丙烯酰胺（29:1）的水溶液，本产品常用于配制各种浓度的变性及非变性聚丙烯酰胺（PAGE）凝胶，进行常规的蛋白或核酸电泳实验，使用方便。
操作步骤：
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度，最佳胶浓度请参考下表。
SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围：
SDS-PAGE 分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
6%胶 | 50-150 kD |
8%胶 | 30-90 kD |
10%胶 | 20-80 kD |
12%胶 | 12-60 kD |
15%胶 | 10-40 kD |
I 灌制分离胶（各试剂使用量请参考下表）
配制SDS-PAGE分离胶：
分离胶浓度 | 凝胶体积 | 所需各组分体积（单位：ml） |
纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | SDS-PAGE Separating Gel Buffer（4×） | 10%A PS | TEMED |
6% | 5 ml | 2.75 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
10 ml | 5.5 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 |
15 ml | 8.25 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 |
20 ml | 11 | 4.0 | 5 | 0.2 | 0.016 |
8% | 5 ml | 2.42 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
10 ml | 4.8 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 |
15 ml | 7.25 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 |
20 ml | 9.7 | 5.3 | 5 | 0.2 | 0.012 |
10% | 5 ml | 2.08 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10 ml | 4.17 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 |
15 ml | 6.25 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 |
20 ml | 8.3 | 6.7 | 5 | 0.2 | 0.008 |
12% | 5 ml | 1.75 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10 ml | 3.5 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 |
15ml | 5.25 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 |
20ml | 7.0 | 8.0 | 5 | 0.2 | 0.008 |
15% | 5ml | 1.25 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 2.5 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 |
15ml | 3.75 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 |
20ml | 5 | 10.0 | 5 | 0.2 | 0.008 |
1．参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。
注：加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触，是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
2．将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。
3．加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
4．在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液（对于mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可）， 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层，使凝胶表面保持平整。
5．静置30-60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，表面凝胶已聚合。
II 灌制浓缩胶（各试剂使用量请参考下表）
凝胶体积 | 所需各组分体积（单位：ml） |
纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | SDS-PAGE Stacking Gel Buffer（4×） | 10%APS | TEMED |
2ml | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
4ml | 2.28 | 0.68 | 1 | 0.04 | 0.004 |
6ml | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
8ml | 4.56 | 1.36 | 2.0 | 0.08 | 0.008 |
1．去除覆盖在分离胶上的水层。
2．将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
3．加入10%过硫酸铵和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
4．将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5．将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
6．静置10~20分钟，等待浓缩胶聚合。
7．待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。
8．进行常规电泳操作。
仅供研究使用； 不用于诊断过程。
王经理