KC1049 kingmorn 6×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 6×SDS-PAGE Protein Loading Buffer
货号:KC1049
规格:2ml;10ml
产品简介:
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer, 6X),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,6倍浓缩的蛋白上样缓冲液,用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。
SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异,SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的空间结构,消除了蛋白结构之间的差异。因此,电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
使用说明:
1. 在室温或不超过37ºC的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液(6X)。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。
2. 按照每5微升蛋白样品加入1微升蛋白上样缓冲液(6X)的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(6X)。
3. 100ºC或沸水浴加热3-5分钟,以充分变性蛋白。
注意:如果起始时细胞或组织的用量较大,基因组DNA含量较高,煮沸3-5分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体。此时需要再煮沸5-10分钟或者加入适量稀释成1X的蛋白上样缓冲液后再煮沸3-5分钟。充分煮沸后一方面可以使结合在基因组DNA上的蛋白充分释放,同时会导致基因组DNA的部分断裂从而使粘稠感消失,这样就不会影响后续的上样操作了。
4. 冷却到室温后,直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5. 通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
保存条件:
-20ºC保存,一年有效。
注意事项:
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X)中含少量DTT,有轻微刺激性气味,但不含剧毒的巯基乙醇。
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X)必须完全溶解后再使用。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
仅供研究使用; 不用于诊断过程。